技术

NIR

近红外光谱法

NIR 技术通常用于分析来料或直接用于生产过程。NIR 技术能够同时快速无损地确定各种参数。

什么是近红外光谱法?

近红外 (NIR) 光谱是基于样品内分子键对近红外辐射(800 nm 至 2500 nm)的响应。当近红外光与样品相互作用时,光会被吸收、散射或反射。这些样品与光相互作用而产生光谱,它直接表示样品的组成和物理特性。

吸收(峰)是指不同的功能组,具体取决于被吸收光的波数/波长/能量。例如,含有水分的产品的近红外光谱在约 1400 至 1500 nm(7100 至 6500 cm-1)和约 1900 至 2000 nm(5200 至 5000 cm-1)的范围内,显示 O-H 功能组。

图 1:某种样品类型的近红外光谱示例
图 2:不同功能组的吸收区域
 波段组合
 第一泛音
 第二泛音
 第三泛音

近红外光谱中的波峰很宽,而且往往重叠。从频谱中直接获得信息几乎是不可能的。相反,需要根据标准(湿化学)方法的参考数据进行标定。因此,NIR是一种所谓的二级方法,测量是基于化学计量学校准模型的预测。

虽然校准本身可能是资源密集型的,但常规分析非常快速且有效。NIR 方法非常易于使用,因此任何技能水平的操作员都能获得良好的测量结果。为加快 NIR 技术的实施,可以使用包含不同成分和来源的流形样品预校准应用

近红外光谱可以测量哪些参数?

校准系统后,只要成分对近红外光谱有影响,就可以测量许多不同的参数。由于无机物质与 NIR 光的相互作用较低这一事实,NIR 分析主要针对有机物质。最常分析的参数列在表中,但还有乳糖、盐、麸质、酸、酒精等更多参数。

  • 水分
  • 蛋白质
  • 脂肪(或油)
  • 灰分
  • 光纤

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如何建立 NIR 校准模型

与应用类型、定量分析或标识无关,需要向仪器《教授》矩阵和成分。

要建立定量校准,必须使用 NIR 仪器测量样品,然后用凯氏定氮法、脂肪提取法、干燥炉、HPLC、滴定等参考方法进行分析,然后根据 NIR 光谱和指定的参考值建立校准模型。由于每个矩阵(产品类型)会产生不同的频谱,每个矩阵和参数都需要一次校准。例如,奶酪中水分的校准无法用于确定面粉中的水分。

图 3:开发定量 NIR 校准的过程
Ⓐ 使用 NIR 仪器进行测量
Ⓑ 参考分析(例如,提取法)
Ⓒ 为光谱添加参考值
Ⓓ 开发或更新校准
图 4:显示预测值与参考值的 NIR 校准图

按照此程序,可以创建多种产品和参数的校准。一般而言,近红外光谱可用于测量百分比范围内的参数;在较低范围内的测定不太准确,甚至无法进行测定。区分具有相似化学结构的两个不同参数是很难的。

在进行原材料鉴定时,应创建所谓的集群校准。在此,记录不同产品的 NIR 光谱,然后将其分配给不同的物质。如果一种物质的光谱适合其中一个集群,它就被认为是这种物质。

图 5:在近红外光谱中如何进行集群校准
Ⓐ 使用 NIR 仪器进行测量
Ⓑ 参考分析(例如,HPLC)
Ⓒ 将物质分配到光谱中
Ⓓ 开发或更新校准
图 6:NIR 集群校准的二维投影示例
Ⓐ 纤维素
Ⓑ 二氧化硅
Ⓒ 葡萄糖
Ⓓ 淀粉

开发成功 NIR 校准模型的技巧

NIR 仪器测量的精度和精确度取决于校准模型,该模型本身又取决于校准样品的数量、校准样品的选择以及主要分析方法获得的参考值的质量。

NIR 校准模型开发中的系数

  • 校准样品应能代表产品变量(如成分、粒径、供应商/批次差异、杂质、温度范围、季节等)的整体范围。

  • 构建校准需要多少样本并不容易预测。样品应均匀分布在整个预期样品范围内;如果工作范围较大,则需要比工作范围较小时更多的样品来建立校准。样本量越大,样本覆盖的可变性越大,校准模型的鲁棒性就越强。

  • 校准范围应大于工作范围,以提高工作范围限制下的性能。超出校准范围的预测仅仅是推断。

  • NIR 稳健校准需要可靠的参考值。需要考虑参考方法的标准误差和测量不确定度,因为它们是在校准模型中进行的。参考方法得到的结果越精确,校准模型就越精确。这些方法应在整个 NIR 校准开发周期内保持不变,因为不同的实验室方法可以显示不同的结果,并且彼此之间也有不同的精度和精确度。

NIR、IR 和 Raman

所有这三种分析方法都能提供结构化指纹,并在几秒内提供测量结果。尽管如此,还是存在一些差异。

表 1:NIR、IR 和 Raman 光谱的优劣势
 

优点

局限性

NIR

- 渗透样品的能力比中程 IR 强得多

- 测量更多异质样品的可能性(与 ATR-IR 形成对比)

- 无需样品制备和稀释

- 无损方法

- 可以用极性键测量参数(O-H、N-H、S-H、C-O 等)

- 简单的系统组件,包括作为光源的简单灯模块

- 分辨率低于 IR 和 Raman

- 如果通过容器/袋测量样品,也需要进行校准

- 难以测量无机物质或杂环化合物等非极性分子

IR

- 强吸收带(基本振动与泛音)

- 吸收带分离良好

- 可用于通过吸收带的强度量化混合物中的单个成分

- 可用于根据光谱库识别物质

- 不能用于含有大量水分的样品,因为水分的峰值可能与感兴趣的峰值重叠

- 更复杂的样品制备(如果不是 ATR-IR,这只是一种表面法)

- 由玻璃石英或蓝宝石制成的廉价和易于取用的样品架和仪器组件(如光纤探头),由于其本身的吸收作用而无法使用

Raman

- 无损方法

- 峰值较窄,分离效果优于 NIR

- 激光作为光源的快速测量

- 无粒径或晶体结构影响;另一方面,这可能是重要的信息

- 容器/袋对测量的影响很小

- 只能用于检测非极性键

- 无法用于分析水分含量

- 激光作为光源会导致仪器组件更加复杂,并导致样品过热的危险

- 显示荧光的样品很难测量

总体而言,这三种方法在质量控制和工艺技术中都发挥着关键作用,应仔细评估哪一种方法对所询问的应用最有益。